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霍乱毒素 B 亚基(Cholera Toxin Subunit B,CTB) :CTB-555
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【产品推荐】CTB-594/CTB-647荧光逆行示踪剂,助力神经环路多通道精细解析

82 人阅读发布时间:2026-10-16 16:22

简介

霍乱毒素B亚基(Cholera Toxin Subunit B,CTB/CT-B)是神经科学领域公认的经典逆行示踪试剂,以低细胞毒性、操作便捷的优势,广泛应用于神经投射通路解析、核团神经元分型、脑区定位验证等研究场景。

枢密在原有CTB-488、CTB-555经典产品基础上,全新推出CTB-594、CTB-647两款产品,现已覆盖Alexa Fluor 488/555/594/647四种常用荧光通道,可灵活满足单通道标记、多色共标、深层组织成像等多样化实验需求。

 

二、示踪原理

CTB的高效逆行示踪能力,来源于它对单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)的高亲和力结合特性以及神经元固有的胞内物质运输路径:

1.膜表面结合:神经元细胞膜表面广泛表达GM1,CTB可通过高亲和力特异性识别并结合GM1,稳定附着于细胞膜表面。

2.胞吞与逆向轴浆运输:结合后的CTB通过受体介导的胞吞作用进入细胞;当CTB被轴突末梢摄取后,会借助神经元的逆向轴浆运输系统,沿轴突自末梢向胞体方向逆行转运。

3.胞体富集显影:最终CTB富集于上游投射神经元的胞体内,依靠偶联的荧光信号(Alexa Fluor 488/555/594/647)清晰显示逆行标记的神经元胞体,完成环路层面的神经元标记。

CTB仅保留霍乱毒素B亚基结构,无A亚基的酶活性与细胞毒性、生物相容性优异,可兼容后续免疫荧光与分子检测实验。

 

三、产品介绍

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四、产品使用指南

试剂浓度:1 μg/μL。

使用方法:即用型,无需稀释可直接使用。

保存条件:-80℃避光保存,建议分装使用,避免反复冻融。

运输条件:干冰运输。

 

五、应用场景

1.神经环路逆行示踪

CTB注射至目标核团后,可逆行标记向该靶区投射的上游核团神经元,解析脑区间投射关系,绘制环路图谱。可搭配不同荧光CTB实现多色并行标记,同时追踪多条神经投射。

2.投射神经元分型

逆行示踪基础上,结合ChAT、GAD、CaMKIIα等神经元特异性标志物做免疫荧光共标,鉴定投射神经元细胞类型。(通常建议注射后5-10天灌流取材)

3.脑内核团定位标记

CTB经立体定位注射至目标核团后可被细胞原位摄取,注射后可即刻灌流取材,用于校验立体定位注射位点、评估试剂扩散范围等。

 

六、效果展示

实验动物:C57BL/6小鼠

注射位点:腹侧被盖区(VTA)

注射剂量:300 nL(浓度1 μg/μL)

表达时间:5天

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图1. CTB-555注射位点及逆行示踪脑区

 

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图2. CTB-488注射位点及逆行示踪脑区

(注:CTB-488逆行标记效率有限,逆标稳定性受实验条件影响,实际效果以实验实测为准,本产品不对逆标效果进行承诺。)

实验动物:C57BL/6小鼠

给药位点:角膜(刮除角膜上皮后,将CTB-594滴加于去上皮角膜表面)

给药剂量:共1 μL(浓度1 μg/μL)分5次滴加

表达时间:48 h

 

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图3. CTB-594角膜给药逆行标记三叉神经节神经元

(A)角膜给药-神经节标记通路示意图。(B)CTB-594标记三叉神经节神经元高倍成像。(Launay, Pierre-Serge et al., Experimental eye research, 2015.)

 

实验动物:Sprague-Dawley大鼠

注射位点:黑质(SN)

注射剂量:400 nl(浓度4 μg/μL)

表达时间:7天

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图4.CTB-647注射位点及逆行示踪脑区

(Altshuler, Rachel D et al., Frontiers in cellular neuroscience, 2025.)

 

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