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枢先生
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82 人阅读发布时间:2026-10-16 16:22
简介
霍乱毒素B亚基(Cholera Toxin Subunit B,CTB/CT-B)是神经科学领域公认的经典逆行示踪试剂,以低细胞毒性、操作便捷的优势,广泛应用于神经投射通路解析、核团神经元分型、脑区定位验证等研究场景。
枢密在原有CTB-488、CTB-555经典产品基础上,全新推出CTB-594、CTB-647两款产品,现已覆盖Alexa Fluor 488/555/594/647四种常用荧光通道,可灵活满足单通道标记、多色共标、深层组织成像等多样化实验需求。
二、示踪原理
CTB的高效逆行示踪能力,来源于它对单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)的高亲和力结合特性以及神经元固有的胞内物质运输路径:
1.膜表面结合:神经元细胞膜表面广泛表达GM1,CTB可通过高亲和力特异性识别并结合GM1,稳定附着于细胞膜表面。
2.胞吞与逆向轴浆运输:结合后的CTB通过受体介导的胞吞作用进入细胞;当CTB被轴突末梢摄取后,会借助神经元的逆向轴浆运输系统,沿轴突自末梢向胞体方向逆行转运。
3.胞体富集显影:最终CTB富集于上游投射神经元的胞体内,依靠偶联的荧光信号(Alexa Fluor 488/555/594/647)清晰显示逆行标记的神经元胞体,完成环路层面的神经元标记。
CTB仅保留霍乱毒素B亚基结构,无A亚基的酶活性与细胞毒性、生物相容性优异,可兼容后续免疫荧光与分子检测实验。
三、产品介绍

四、产品使用指南
试剂浓度:1 μg/μL。
使用方法:即用型,无需稀释可直接使用。
保存条件:-80℃避光保存,建议分装使用,避免反复冻融。
运输条件:干冰运输。
五、应用场景
1.神经环路逆行示踪
CTB注射至目标核团后,可逆行标记向该靶区投射的上游核团神经元,解析脑区间投射关系,绘制环路图谱。可搭配不同荧光CTB实现多色并行标记,同时追踪多条神经投射。
2.投射神经元分型
逆行示踪基础上,结合ChAT、GAD、CaMKIIα等神经元特异性标志物做免疫荧光共标,鉴定投射神经元细胞类型。(通常建议注射后5-10天灌流取材)
3.脑内核团定位标记
CTB经立体定位注射至目标核团后可被细胞原位摄取,注射后可即刻灌流取材,用于校验立体定位注射位点、评估试剂扩散范围等。
六、效果展示
实验动物:C57BL/6小鼠
注射位点:腹侧被盖区(VTA)
注射剂量:300 nL(浓度1 μg/μL)
表达时间:5天

图1. CTB-555注射位点及逆行示踪脑区

图2. CTB-488注射位点及逆行示踪脑区
(注:CTB-488逆行标记效率有限,逆标稳定性受实验条件影响,实际效果以实验实测为准,本产品不对逆标效果进行承诺。)
实验动物:C57BL/6小鼠
给药位点:角膜(刮除角膜上皮后,将CTB-594滴加于去上皮角膜表面)
给药剂量:共1 μL(浓度1 μg/μL)分5次滴加
表达时间:48 h

图3. CTB-594角膜给药逆行标记三叉神经节神经元
(A)角膜给药-神经节标记通路示意图。(B)CTB-594标记三叉神经节神经元高倍成像。(Launay, Pierre-Serge et al., Experimental eye research, 2015.)
实验动物:Sprague-Dawley大鼠
注射位点:黑质(SN)
注射剂量:400 nl(浓度4 μg/μL)
表达时间:7天

图4.CTB-647注射位点及逆行示踪脑区
(Altshuler, Rachel D et al., Frontiers in cellular neuroscience, 2025.)
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