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枢先生
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451 人阅读发布时间:2023-06-12 15:49
服务简介
质谱是将待测物质转化为气态离子并将离子按质荷比(m/z)进行分离,检测各种离子谱峰的强度而实现分析的一种方法。蛋白质质谱鉴定基于鸟枪法(Shot-gun),将蛋白条带或蛋白溶液酶切成肽段混合物,经高效液相色谱分离得到若干较为简单的组分,进入高分辨率质谱仪中进行分析。检索软件根据二级质谱信息与相应的数据库比对,结合匹配度打分及错配过滤,可得到肽段的确切序列,进而拼接出各蛋白的完整序列,从而实现对蛋白的鉴定。液质联用,分离效果好、分析速度快。可分析的样本包括2DE PAGE中的蛋白胶点、免疫共沉淀(Co-IP)样品、1D-SDS PAGE分离的蛋白胶条、蛋白质溶液等。双向电泳斑点或纯化蛋白质等简单样本,通常选择串联质谱(MS/MS)鉴定分析;蛋白质溶液、SDS-PAGE条带等混合样本,通常选择液相-串联质谱(LC-MS/MS)鉴定分析。质谱仪包括:高分辨率质谱平台技术,包括Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。1、亚细胞组分全谱分析
2、免疫共沉淀Co-IP后的互作蛋白鉴定
3、复杂蛋白质样本鉴定
