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枢先生
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3537 人阅读发布时间:2023-06-13 15:24
1.基本原理
电生理技术是指以多种形式的能量(电、声等)刺激生物体,测量、记录和分析生物体发生的电现象(生物电)和生物体的电特性的技术。生物体细胞内外由于膜两侧离子分布不均匀导致两侧存在电位差,通常将细胞未受到刺激时非兴奋时的电位称为静息电位(一般将细胞膜外电位设为0mV),不同细胞静息电位不同(大脑皮层神经元细胞为-70mV),当细胞去极化(细胞膜电位绝对值降低)会使细胞产生兴奋,而当细胞超极化(细胞膜电位绝对值升高)则可使细胞抑制。电生理实验就是采用电极记录神经元细胞膜内外的电压变化,并可用生物传感器来检测不同细胞数值,通过电生理记录或行为学测试等方法,将刺激对神经元、神经回路或动物行为的改变呈现出来,反映脑区对各种行为的调控。
2. 优势
3.常用研究领域检测内容推荐
【突触可塑性、学习记忆机制研究】检测场电位:输入输出曲线(I/O curve);配对脉冲比(paired-pulse ratios,PPR);可塑性长时程增强(Long-Term Potentiation,LTP)/长时程抑制(Long-Term Depression,LTD),反映学习记忆细胞突触机制。
【细胞活性研究】全细胞记录动作电位(action potential,AP):包括频率、膜电位、阈值、峰间隔、潜伏期、波宽等指标,反映细胞整体兴奋性输出。
【细胞兴奋和抑制突触前、突触后机制研究】检测微小mIPSC、mEPSC和自发sIPSC、sEPSC的频率和幅度,诱发eIPSC、eEPSC和诱发配对脉冲比PPR的幅度,反映细胞主要兴奋性谷氨酸能和抑制性GABA能突触输入,分析突触兴奋前后机制。
【药物筛选研究】检测瞬时外向钾电流、内向整流钾电流等多种钾离子通道和动作电位时程,对抗心律失常药物进行筛选。
【细胞胞吐和胞吞功能研究】采用膜片钳技术检测细胞膜电容反映细胞表面积变化,从而分析细胞胞吐和胞吞功能。
4.案例分析


图2.(A)全细胞膜片钳记录微小兴奋性突触后电位(mEPSC)和诱发兴奋性突触后电位(eEPSC)的配对脉冲比(PPR)。(B)全细胞膜片钳记录微小抑制性突触后电位(mIPSC)和诱发抑制性突触后电位(eIPSC)的配对脉冲比(PPR)。

图3. 全细胞记录动作电位及相关指标分析。包括静息膜电位(resting membrane potential,RMP)、阈值(threshold)、幅度(amplitude)、潜伏期(first latency)、峰间隔(inter-spike interval,ISI),后超极化电位(afterhyperpolarization,AHP)幅度等。

5.参考文献
[1]An Y, Guan X, Ni Y, et al. Neurochem Int. 2020 Sep;138:104774.
[2]Sun S, Delgado J, Behzadian N, et al. Curr Protoc Neurosci. 2020 Sep;93(1):e99.
[3]Oyunbaatar NE, Dai Y, Shanmugasundaram A, et al. ACS Sens. 2019 Oct 25;4(10):2623-2630.

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神经环路示踪病毒载体、基因编辑(敲入、敲除、点突变、敲低)、基因过表达/干扰服务、行为学小鼠模型构建、干细胞诱导分化、整包服务等。