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circRNA过表达及干扰
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武汉枢密脑科学技术有限公司
入驻年限：8 年
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枢先生
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湖北 武汉市 江夏区
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抗体、试剂、细胞库 / 细胞培养、技术服务、耗材、实验室仪器 / 设备
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circRNA 干扰及过表达知多少
4230 人阅读发布时间：2023-06-13 16:44
环状 RNA（circRNA）与传统的线性 RNA（linear RNA，含5’和3’末端）不同，circRNA 是一类不具有 5' 末端帽子和 3' 末端 poly(A)尾巴的非编码 RNA 分子，并以共价键形成封闭环状结构，由非经典剪接方式进行反向剪接而形成。不受 RNA 外切酶影响，表达更稳定，不易降解。circRNA 是 RNA 领域最.新的研究热点，研究表明，circRNA 在生物的生长发育、对外界环境的抵御、疼痛等方面具有重要的调控作用。circRNA 功能众多，可作为 miRNA 的海绵，竞争性结合 miRNA，发挥 ceRNA 的调控功能，调控基因表达。近年来还发现与疾病的发生和发展密切相关，在疾病诊断标记物等方向具有很大的应用前景。
一、circRNA 干扰服务
RNA 干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。RNA 干扰 (RNA interference, RNAi)技术通过将与内源 mRNA 同源的小片段（19-23 bp）外源双链 RNA（siRNA）导入细胞中，引发细胞中相应 mRNA 高效特异性降解，从而导致特定基因表达沉默或下调（knock down）。枢密科技针对 circRNA 的接头序列设计多条 siRNA 序列，筛选特异性高效干扰目的 circRNA 表达的 siRNA，构建 shRNA 病毒载体并包装所需病毒。也可直接转染或通过包装慢病毒感染细胞筛选 circRNA 特异性敲低稳定细胞株。
服务流程
二、circRNA 过表达服务
目前枢密科技提供 pAAV-ciR、pLV-ciR 等 circRNA 过表达载体构建服务，同时可选择携带各种荧光报告基因或抗性基因，适用于普通真核表达、慢病毒包装与稳转细胞系建立、腺相关病毒包装等多种用途。该系列载体均含有 circRNA 环化表达框架，用于克隆目标 circRNA 的线性序列，之后转染细胞后可通过 RNA 反向剪切形成 circRNA分子。
服务流程
一、circRNA 干扰服务
RNA 干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。RNA 干扰 (RNA interference, RNAi)技术通过将与内源 mRNA 同源的小片段（19-23 bp）外源双链 RNA（siRNA）导入细胞中，引发细胞中相应 mRNA 高效特异性降解，从而导致特定基因表达沉默或下调（knock down）。枢密科技针对 circRNA 的接头序列设计多条 siRNA 序列，筛选特异性高效干扰目的 circRNA 表达的 siRNA，构建 shRNA 病毒载体并包装所需病毒。也可直接转染或通过包装慢病毒感染细胞筛选 circRNA 特异性敲低稳定细胞株。
服务流程
- 客户提交 circRNA 资料（ID 号或者序列）、构建要求
- 设计多条 siRNA，筛选高效率干扰 siRNA
- 设计 circRNA 特异性引物，检测敲低 circRNA 的效率
- 构建 shRNA 载体，干扰慢病毒或腺相关病毒包装
- 稳定细胞株构建（可选，需要客户提供目标细胞）
二、circRNA 过表达服务
目前枢密科技提供 pAAV-ciR、pLV-ciR 等 circRNA 过表达载体构建服务，同时可选择携带各种荧光报告基因或抗性基因，适用于普通真核表达、慢病毒包装与稳转细胞系建立、腺相关病毒包装等多种用途。该系列载体均含有 circRNA 环化表达框架，用于克隆目标 circRNA 的线性序列，之后转染细胞后可通过 RNA 反向剪切形成 circRNA分子。
服务流程
- 客户提交 circRNA 资料（ID 号或者序列）、构建要求
- circRNA 过表达载体构建
- 载体验证（根据客户选择，默认提供 293 细胞转染验证环化效果）
- 病毒包装
- 稳定细胞株构建（根据客户需要选择，需要客户提供目标细胞）
circRNA 慢病毒载体
circRNA 腺相关病毒载体